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        人胰島素原 (PI)ELISA kit使用說明書

        更新時間:2023-12-21   點擊次數:200次

        人胰島素原  (PI)ELISA使用說明書

        胰島素原(PI)是胰島素的前體激素 , 它是由由胰島β細胞合成和分泌 , 主要 在腎臟分解代謝。生理情況下 ,只有極少量的胰島素原釋放入血 ,在病理情 況下 ,胰島β細胞釋放胰島素原增多 ,血中胰島素原水平升高。 它是細胞在 裂解成成熟胰島素之前分泌的最后一個單鏈蛋白結構。 它是由芝加哥大學的Donald F. Steiner教授在1967年發現的。


        本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA 。往預先包被有人 胰島素原(PI)捕獲抗體的微孔中 ,依次加入樣本、標準品、生物素標記的檢測 抗體 ,HRP  酶結合物 , 中間經過溫育和洗滌 ,用底TMB  顯色 ,TMB 在過 氧化物酶(HRP)的催化下轉化成藍色 ,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色 的深淺和樣品中的人胰島素原(PI)呈正相關。用酶標儀在 450nm  波長下測定

        吸光度(OD   ,計算樣品濃度。

        靈敏度:4.79pg/mL

        檢測范圍12.5-800pg/mL

        特異性:可檢測樣本中人的PI ,且與其類似物無明顯交叉反應。

        image.png

        濃度(pg/mL)

        800

        400

        200

        100

        50

        25

        12.5

        0

        OD  

        2.32

        1.93

        1.31

        0.85

        0.51

        0.39

        0.28

        0.1

        校正 OD  

        2.22

        1.83

        1.21

        0.75

        0.41

        0.29

        0.18

        -


        試劑盒性能:

        1.    重復性 :板內變異系數小于  10% ,板間變異系數小于  10%。

        2.    回收率 :在選取的健康人血清、血漿和細胞培養上清中加入  3  個不同

        濃度水平的人PI ,計算回收率。

         

        樣本類型

        范圍(%

        平均回收率(%

        血清(n=8)

        84- 101

        96

        血漿(n=8)

        92- 105

        102

        細胞培養上清(n=8)

        96- 108

        105

        3.    線性稀釋:分別在選取的4份健康人血清、血漿和細胞培養上清中加入

        高濃度人PI ,在標準曲線動力學范圍內進行稀釋 ,評估線性。

         

        稀釋比例

        回收率(%

        血清

        血漿

        細胞培養上清

        12

        范圍

         

        84-95

         

        88-97

         

        90- 110

        平均回收率

         

        91

         

        93

         

        96

        14

        范圍

        89- 103

        87- 108

        105- 115

        平均回收率

        94

        98

        109



        上海仁捷生物科技有限公司

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